ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 三七响应镉胁迫的生理和分子机制研究/.钱志龙著/.谢世清,范伟指导 |
出版发行项: | 2019.6.5 |
载体形态项: | 59页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 三七(Panax notoginseng ( Burk. ) F. H. Chen)是一种名贵的中药材,具有极高的药用价值,是云南最具特色的中药资源大品种。然而,由于云南土壤重金属地质背景高,云南不仅是三七的道地产区和主产区,也是我国镉(Cd)的产出大省。三七对Cd具有较强的吸收富集遗传特性,且各种植区土壤及植物体均存在不同情况的超标现象,严重影响了三七安全原料生产、饮片药用安全和出口贸易等产业发展。已有的研究主要集中三七Cd富集特性以及与皂苷积累相关性上,缺乏Cd胁迫下潜在生理和分子响应机制的系统解析。本研究以一年生三七为对象,对不同Cd浓度(0、15、25和50 μM Cd)水培条件下三七的光合作用、抗氧化活性、Cd与皂苷积累等生理特性进行研究。进一步结合转录组和代谢组比较分析,初步阐明了三七Cd响应潜在的分子机制,并从中鉴定了一个可能参与三七Cd吸收的天然抗性相关巨噬细胞蛋白(Nramp)家族基因PnNramp3,研究结果为三七原料的安全种植和通过现代生物技术培育低Cd积累三七新种质提供理论基础和实践参考依据。主要的研究结果如下: (1)对不同Cd浓度下三七的生理特性研究发现:Cd胁迫对三七生长发育产生显著影响,在25和50 μM Cd处理下,地上部分出现萎焉现象,特别在50 μM Cd胁迫时表现最为严重,存活率下降到71.4%,且须根生长受到显著抑制,须根数仅为CK的50%;对光合作用研究发现,在15、25和50 μM Cd处理下,三七叶片的净光合速率分别下降19.9%、36.3%和52.4%,Cd胁迫抑制了三七的光合作用,抑制作用随Cd处理浓度的增加而增大;抗氧化活性研究发现,在Cd胁迫下,三七根中过氧化氢酶(CAT)活性受到抑制,而过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性增加,叶片中CAT活性无显著差异,POD和SOD活性增加。另外,抗坏血酸(AsA)含量在50 μM Cd处理的根中含量显著增加;Cd含量和皂苷含量测定显示,Cd主要积累在三七的根部,表现为根>茎>叶,在不同Cd浓度下,五种单体皂苷和总皂苷的含量都有所变化,其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1含量降低,而人参皂苷Re、Rb1、Rd和总皂苷含量增加但变化幅度不大。 (2)对0、15、50 μM Cd处理下三七的转组和代谢组研究发现:与CK相比,15 μM Cd处理下,差异基因总数为1647条,50 μM Cd处理下,差异基因总数3583条,表明高浓度Cd显著影响差异表达基因。进一步对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析发现,参与脂肪酸代谢和黄酮类化合物代谢的差异表达基因优势富集,其中参与脂肪酸代谢的差异表达基因主要为脂肪酸去饱和酶基因(FAD),它们在15 和 50 μM Cd处理下均上调表达,并表现为50 μM Cd下上调幅度最大,这与50 μM Cd 处理中检测到的脂肪酸含量的增加是一致的;参与黄酮类化合物代谢的差异表达基因表现为上调或下调,这与代谢组中黄酮类化合物在15 和 50 μM Cd处理下的增加或减少基本一致。此外,对转录组中可能参与金属离子转运的蛋白家族基因进行分析后发现,天然抗性相关巨噬细胞蛋白(Nramp)、锌铁转运蛋白(ZIP)、铁转运蛋白(IRT)、ABC转运蛋白家族(ABCB)、铜转运蛋白(COPT)、重金属ATPases家族(HMA)、寡肽转运蛋白(PTR)、黄色条纹蛋白(YSL)等家族基因在15 和 50 μM Cd处理下均上调表达,并表现为50 μM Cd下上调幅度最大。 (3)基于金属离子转运蛋白基因的转录组分析,对一个天然抗性相关巨噬细胞蛋白家族基因PnNramp3进行克隆和功能分析。序列分析显示,PnNramp3全长1518 bp,编码505个氨基酸,具有12个跨膜结构域,分子量为55.292 kDa,理论等电点为5.29,不稳定系数28.58,为稳定蛋白,平均亲水性0.671,为疏水性蛋白,不存在信号肽序列,属于非分泌蛋白;进化关系分析显示,PnNramp3与黄胡萝卜中的同源基因亲缘关系最近;本氏烟草中瞬时表达的亚细胞定位显示,PnNramp3定位于细胞质膜,符合细胞转运子的定位特征;野生型BY4741和Cd敏感型Δycf1酵母细胞的异源表达研究发现,PnNramp3在BY4741和Δycf1中的过表达均显著降低酵母对Cd的耐受性,并增加Cd在酵母体内的积累,初步证实了PnNramp3具有Cd转运活性,可能在三七Cd吸收中发挥重要作用。 |
并列题名: | Physiological and Molecular Mechanisms of Panax notoginseng in Response to Cadmium Stress |
题名主题: | 三七 镉积累 转录组 基因 转运蛋白 学位论文 |
中图分类: | Q945.78-533 |
个人名称等同: | 钱志龙 著 |
个人名称次要: | 谢世清 指导 |
个人名称次要: | 范伟 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |