ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
---|---|
作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 云南省猪主要腹泻病毒流行病学调查及PEDV流行毒株的分离鉴定/.袁红著/.宋春莲指导 |
出版发行项: | 2023.5.31 |
载体形态项: | 65页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物医学院, 学号2021240444 |
提要文摘: | 为弄清云南省猪主要腹泻病毒病的流行病学,分析近年来猪流行性腹泻病毒(PEDV)云南流行毒株纤突蛋白(Spike Protein,S蛋白)基因遗传进化特征,为 PED的防控及候选疫苗毒株筛选提供理论依据参考。本文通过建立 PEDV、TGEV、PoRV三重 RT-PCR 和其他腹泻病毒 PoSaV、PaStV、PDCoV 的普通 RT-PCR 检测方法,将2013~2022年间采集自云南省红河、大理、昆明、玉溪、曲靖、文山、临沧、楚雄、保山、昭通、丽江等11个州市的猪腹泻样品共计1851份,进行6种猪腹泻病毒核酸检测,并扩增 PEDV 毒株进行 S 基因序列分析,同时对 PEDV 流行毒株进行分离、鉴定,将建立 PEDV SYBR Green Ⅰ RT-qPCR 方法,测定 PEDV 分离株动态增殖曲线。扩增分离株 S 和 N 全基因,进行遗传进化分析。 实验结果如下: 6种猪主要腹泻病毒的总阳性率达52.95%(980/1851),其中单一病毒感染检出率46.46%(857/1851),混合感染检出率6.65%(123/1851),混合感染以二重感染和三重感染为主,四重以上感染未发现。 28株云南流行毒株均处于同一进化分支,且属于 GⅡ 群,均为变异毒株。氨基酸同源性比对介于91.4%~98.4%之间;与国内外毒株比较,同源性介于85.6%~99.3%之间;与经典弱毒活疫苗毒株 CV777 比较,同源性在86.2%~89.8%之间,均较低;与国内变异疫苗株 AJ1102比较,同源性在90.1%~96.2%之间。氨基酸位点分析,所有28株云南流行毒株与经典疫苗株 CV777 比较,共有73个氨基酸位点发生突变、缺失和插入;与变异疫苗株 AJ1102比较,有11处氨基酸突变。在基因重组中,发现1株潜在重组株为 YN-LC-1803,其余27株无重组现象。 PEDV 流行毒株分离培养盲传至第6代,细胞单层局部表现为细胞出现肿胀、变圆,产生空泡和合胞体等细胞病变,将其命名为 CH/YNQJ/2022毒株;建立的 SYBR Green Ⅰ RT-qPCR 方法具有特异性高、灵敏度强、重复性好等特点。该毒株在 Vero细胞上的增殖变化规律为 8h 开始增殖,32h 病毒增殖达到高峰;经遗传进化分析CH/YNQJ/2022为GⅡa亚群,为变异毒株。 综上所述,2013~2022年云南省11个地州市有6种主要的猪腹泻病毒检出,存在单纯感染和混合感染,感染率最高的是PEDV,其次是 PoRV和PoSaV,提示云南省猪腹泻病感染有普遍流行的态势。28株PEDV云南流行毒株的S基因均为变异毒株,与传统经典疫苗毒株CV777差异很大,为新型PEDV疫苗候选毒株的筛选提高了新思路。成功分离获得一株PEDV,命名为CH/YNQJ/2022,经基因遗传进化分析为变异毒株。 |
并列题名: | Epidemiological investigation of major swine diarrhea virus and isolation and identification of PEDV in Yunnan Province eng |
题名主题: | 云南省 猪腹泻病毒 流行病学调查 PEDV 分离鉴定 学位论文 |
中图分类: | S855.3-533 |
个人名称等同: | 袁红 著 |
个人名称次要: | 宋春莲 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240529 |