ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 细胞自噬对犬间充质干细胞干性的影响/.张迪著/.严玉霖指导 |
出版发行项: | 2019.5.29 |
载体形态项: | 59页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 为探讨细胞自噬对犬BMMSCs干性的影响,从健康犬骨髓内分离和培养犬BMMSCs。将BMMSCs分为对照组、雷帕霉素组和3-MA组,于药物处理后的12h、24h、48h收集细胞。应用流式细胞法检测细胞表面特异性抗原;应用间接细胞免疫荧光法检测自噬微管相关蛋白LC3Ⅱ的表达水平;应用荧光定量PCR检测自噬基因LC3、Beclin1、Atg7,干性相关基因Sox2、Satb2 mRNA转录水平;对不同组的BMMSCs进行成骨及成脂诱导。结果:(1)犬BMMSCs原代培养在接种3d后可见贴壁细胞,流式细胞仪检测BMMSCs的表面特异性抗原,结果显示CD44和CD90 呈阳性表达,CD34、CD45和CD11a呈阴性表达,符合BMMSCs的特征。(2)与对照组相比,雷帕霉素干预BMMSCs后LC3、Beclin1、Atg7、Sox2、Satb2的 mRNA转录水平随着作用时间的延长而呈上调趋势,3-MA干预BMMSCs后LC3、Beclin1、Atg7、Sox2、Satb2的 mRNA转录水平随着感染时间的延长而呈下调趋势。(3)雷帕霉素干预BMMSCs后,细胞免疫荧光法检测自噬微管蛋白LC3Ⅱ的表达量上升,3-MA干预BMMSCs后,细胞免疫荧光法检测自噬微管蛋白LC3Ⅱ的表达量下降。(4)成骨诱导第16d茜素红染色结果为阳性,与对照组相比,雷帕霉素组BMMSCs细胞形态变化最明显且矿化面积较大,3-MA组BMMSCs矿化面积较小且数量较少;成脂诱导第21d油红O染色结果为阳性,与对照组相比,雷帕霉素组BMMSCs脂滴数量较少,3-MA组脂滴数量较多且聚集程度较高;因此雷帕霉素促进BMMSCs自噬后,提高了BMMSCs成骨分化能力,抑制其成脂分化能力;3-MA抑制BMMSCs自噬后,抑制了BMMSCs成骨分化能力,提高其成脂分化能力。结果表明,促进犬BMMSCs自噬水平可以更好地维护其干性和提高其成骨分化能力。 |
并列题名: | Effects of autophagy on the stemness of canine mesenchymal stem cells |
题名主题: | 骨髓间充质干细胞 自噬 成骨诱导 成脂诱导 学位论文 |
中图分类: | S858.292-533 |
个人名称等同: | 张迪 著 |
个人名称次要: | 严玉霖 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |