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： 马铃薯金线虫的鉴定及其生物学特性研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 马铃薯金线虫的鉴定及其生物学特性研究/.邓春菊著/.胡先奇指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.31 |
| 载体形态项： | 60页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 植物保护学院, 学号2020210304 |
| 提要文摘： | 马铃薯金线虫（Globodera rostochiensis）是马铃薯生产中非常重要的检疫性有害生物，包括我国在内的很多国家已经将其列为对外检疫对象。我国已有部分地区报道有该病害发生，所以对于该病害的病原物急需要展开相关研究。本研究通过在云南省马铃薯主要种植区昭阳区、鲁甸县、大关县、永善县和巧家县的马铃薯种植地对孢囊线虫的发生情况进行初步调查，采用以形态学为主、分子生物学为辅助的方法鉴定分离到的马铃薯孢囊线虫群体GR-1进行鉴定，并研究该线虫的生物学特性，包括胚胎发育过程、孢囊卵孵化条件、生活史及致病性、寄主范围等。主要结果如下： 1. 在所采集的296份样品中，共检测出168份样品中存在马铃薯金线虫孢囊，检出率为56.8 %。 2. 应用形态学和分子生物学方法结合进行鉴定，所调查区域发现的马铃薯孢囊线虫是马铃薯金线虫（Globodera rostochiensis）。采用形态学的方法，对分离到的孢囊、雌虫及2龄幼虫进行种类鉴定。雌虫：虫体为白色，近球形，颈部突出，角质层逐渐变成金黄色；孢囊颈部突出，无终锥（Terminal Cone）；卵呈椭圆形，白色卵粒包裹在孢囊内，无卵块；阴门锥为单环膜孔型，膜孔呈圆形，肛门上方有一个明显的“ V ”形标记。肛门开口比阴门小，肛门区无膜孔；角质层表面呈锯齿状突起，有明显的褶皱。2龄幼虫：蠕虫状，两端呈环形并逐渐变细。虫体角质层的环纹较清晰，侧区有4条明显的侧线，虫体两端的侧线有3条；幼虫头部骨架化较强，呈圆形；口针粗壮，口针基部球呈球形。尾部最末端有一个透明区域，透明区长占尾长的1/2-2/3。分子鉴定表明，与报道的马铃薯金线虫一致。采用分子生物学（28S rDNA-D2/D3-PCR、mtDNA-cox1-PCR）的方法鉴定结果如下，该线虫28S rDNA-D2/D3 区PCR扩增产物为 784 bp，其核酸序列与NCBI数据库中登录的马铃薯金线虫（登录号：MZ057600.1、MZ570260.1、MK534182.1、KJ409625.1、KJ409631.1、MZ057596.1）相似度为 99.11 %~100.00 %；其 mtDNA-cox1 区扩增产物为 447 bp，序列与 NCBI 数据库中登录的马铃薯金线虫（登录号：MF773722.1、MH399817.1、MH399817.1、MH399815.1、MT240262.1、MN095979.1）相似度为 99.28 %~99.33 %；系统进化树构建表明，该线虫28S rDNA-D2/D3 区序列、mtDNA-cox1 区序列均以 100.00 %的支持率与马铃薯金线虫聚在一个分支上；经马铃薯金线虫特异性引物 ITS5/PITSr3和ITS5/ PITSp4 鉴定，该线虫能扩增出约 430 bp 条带。 3. 马铃薯金线虫在不同寄主根系中发育进程不一致。马铃薯金线虫在马铃薯根系中从单胞卵发育成成熟孢囊需要约52.5 d，在番茄根系中从单孢卵发育成成熟孢囊需要约48.5 d。在25℃下，马铃薯金线虫胚胎从单胞卵到2龄幼虫需要约12.5-14.0 d。胚胎发育经过单细胞、双胞期、三胞期、四胞期、五胞期、六胞期、八胞期，此过程历时约12.0 -14.0 h；然后进入多胞期、囊胚期、原肠胚期、一龄幼虫发育成二龄幼虫，历时9.5.-13.0 d。23 -31℃下，马铃薯金线虫在不同寄主中发育进程不同。马铃薯金线虫在马铃薯根系中从二龄幼虫发育成雌成虫需要32 d，在番茄根系中需要24 d；马铃薯金线虫在马铃薯根系上从二龄幼虫发育为成熟孢囊需要40 d，在番茄根系中需要36 d。马铃薯金线虫能侵染马铃薯和番茄并繁殖，接种约50 d后，在马铃薯和番茄上形成成熟孢囊，完成生活史，证明该线虫对马铃薯和番茄有危害。 4. 马铃薯和番茄根系分泌物均能刺激马铃薯金线虫卵孵化，在25℃下，14天累积孵化率分别为45.8 %、40.0 %；马铃薯金线虫卵孵化的最适温度范围为 20℃-25℃，在马铃薯根系分泌物中14 d累积孵化率为26.4 -32.3 %；最适pH值为7，25℃下的14天累积孵化率为1.4 %。 5. 初步明确了马铃薯金线虫的寄主范围。通过对我国9科22种作物及田间杂草的人工接种试验和田间调查，结果表明：马铃薯金线虫能在本研究所选的4种茄科植物（马铃薯、番茄、茄子、刺天茄）上完成生活史；马铃薯金线虫可以侵染茄科（龙葵、辣椒、烟草），蓼科（酸模叶蓼、野荞麦、荞麦），但是未发现孢囊，所以推测马铃薯金线虫不能在这些供试植物顺利完成生活史；在其他科的供试植物上均未发现有该线虫侵染。 综上所述，目前在云南昭通市马铃薯主产区发现的马铃薯孢囊线虫属于马铃薯金线虫。同时，初步探查了马铃薯金线虫的胚胎发育过程、生活史、致病性及寄主范围，明确了根系分泌物、温度、PH对马铃薯金线虫卵孵化的作用，类似研究在国内尚未见报道。这些研究结果将为深入研究传入我国的马铃薯金线虫提供有益的参考。 |
| 并列题名： | Identification and Biological Characteristics of Golden Potato Nematode Globodera rostochiensis |
| 题名主题： | 马铃薯金线虫 形态鉴定 分子生物学鉴定 胚胎发育 寄主范围 学位论文 |
| 中图分类： | S435.32-533 |
| 个人名称等同： | 邓春菊 著 |
| 个人名称次要： | 胡先奇 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |