书目详细信息
： 利用农杆菌介导藜麦遗传转化体系的研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 利用农杆菌介导藜麦遗传转化体系的研究/.常飘著/.董玉梅指导 |
| 出版发行项： | 2022.06.09 |
| 载体形态项： | 49页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 农学与生物技术学院,学号2019210106 |
| 提要文摘： | 藜麦由于特有的营养价值以及对非生物胁迫的潜在抗性价值，引起了人类的日益重视。但目前中国藜麦研究存在的最大问题是品种资源匮乏，因此加强中国藜麦遗传育种的研究迫在眉睫。为获得农杆菌介导的藜麦遗传转化体系，本研究在建立藜麦再生和快繁体系的基础上，利用农杆菌浸种法转化藜麦种子，旨在建立一套高效、实用、简便的转化体系，为藜麦的分子育种提供技术支持。主要研究结果如下： 1. 再生和快繁体系的研究。通过制备无菌苗、愈伤组织诱导、不定芽分化、腋芽增殖、壮苗、生根和移栽，筛选出藜麦再生和快繁中各阶段的最适培养基配方。结果表明，藜麦种子最适消毒配方为75%酒精30 s + 2% NaClO 15 min；4个藜麦品系中，TW-24的愈伤组织诱导效果最适；MS + NAA 2.5 mg/L + 6-BA 2.0 mg/L是藜麦愈伤组织诱导的最适培养基，诱导率达到97.33%；最适不定芽再分化培养基为MS + NAA 0.2 mg/L + 6-BA 2.0 mg/L + KT 1.0 mg/L + 2-IP 1.0 mg/L + 500 mg/L CH + 200 mg/L Glu，再分化率为31.67%；MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L + 活性炭5 mg/L是藜麦腋芽增殖的最适培养基，增殖系数为7.6；壮苗培养基为MS + 6-BA 0.05 mg/L + NAA 0.15 mg/L，不添加任何激素的MS培养基为藜麦的最适生根培养基，生根率为93.33%；生根后的试管苗经驯化后成功移栽。 2. 转化体系的研究。将含有GUS基因和草铵膦抗性基因的pCAMBIA3301质粒转入农杆菌菌株EHA105作为工程菌。以藜麦种子为受体材料，利用农杆菌浸种法进行遗传转化时发现农杆菌侵染浓度和时间，共培养温度和时间都对的转化率有影响。经选择压筛选、农杆菌侵染、共培养、选择培养、GUS染色和PCR检测，结果表明：草铵膦的选择压为5 mg/L；在农杆菌侵染藜麦种子时，菌液OD600=0.8、侵染30 min，在23℃下共培养48 h转化率最高，为3.33%，获得2株PCR阳性株。 本研究成功建立藜麦再生和快繁体系，并利用农杆菌浸种法转化藜麦种子，构建农杆菌介导的藜麦遗传转化体系，筛选出耐除草剂植株，为保存藜麦优质种质资源、基因功能验证和分子育种提供技术支撑。 |
| 并列题名： | Study on Agrobacterium-Mediated Genetic Transformation System of Quinoa eng |
| 题名主题： | 藜麦 再生体系 转化体系 农杆菌浸种法 GUS染色 PCR检测 学位论文 |
| 中图分类： | S516-533 |
| 个人名称等同： | 常飘 著 |
| 个人名称次要： | 董玉梅 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20230324 |