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： 植物乳杆菌L3抑菌物质筛选及其形成机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 植物乳杆菌L3抑菌物质筛选及其形成机制研究/.柴云美著/.黄艾祥指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.17 |
| 载体形态项： | 65页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210090 |
| 提要文摘： | 微生物污染导致的食品安全问题已成为一个世界性难题，目前使用乳酸菌抑制微生物是最好的方法，而解析乳酸菌抑菌物质及其形成机制也越来越受到人们的重视。本研究以课题组前期筛选的产益生功能因子，且能有效抑制发酵乳中霉菌和酵母生长的植物乳杆菌（L. plantarum）L3为材料，基于LuxS/AI-2群体感应（quorum sensing, QS）系统和多组学手段，解析L. plantarum L3高产苯乳酸（phenyllactic acid，PLA）的机制。本文为利用乳酸菌发酵剂抑制有害微生物及高效、规模生产PLA提供科学依据。研究结果如下： （1）明确L. plantarum L3的抑菌活性 采用牛津平板法测定L. plantarum L3无细胞上清液（Cell-Free Supernatant, CFS）的抑菌活性，结果表明L. plantarum L3 CFS抑菌圈直径为21.8±1.1 mm，具有较强的抑菌作用；加入L. plantarum L3的发酵乳中霉菌数量减少了1.48 log CFU/mL，可防止发酵乳变质；在苹果贮藏中添加L. plantarum L3 CFS可有效抑制苹果中霉菌的生长，延长苹果贮藏期。
①使用过氧化氢酶处理L. plantarum L3 CFS，结果表明过氧化氢不是L. plantarum L3的抑菌物质。 ②基于肽组学分析，从L. plantarum L3 CFS中鉴定了67条细菌素，根据数据库的抑菌活性、构效关系预测，筛选了3条抑菌潜力最高的细菌素（KPYVPFPK、FYFTIPK、DTLHGMFPK）进行生物合成，结果发现对霉菌的抑菌效果不明显。 ③当pH调至中性时，L. plantarum L3 CFS的抑菌活性显著降低（P<0.05），说明抑菌物质是酸类物质，进一步将未处理的L. plantarum L3 CFS代谢分析表明，共鉴定出675种代谢物，有机酸及衍生物所占比例最大（31.26 %），其中PLA是具有抑菌作用且含量最高的物质。 （3）LuxS/AI-2群体感应系统介导的L. plantarum L3高产PLA机制 ①L. plantarum L3群体感应系统的研究：利用全基因组测序对L. plantarum L3进行研究，结果显示L. plantarum L3具有AI-2信号分子合成的关键基因LuxS；进一步测定了AI-2信号分子、PLA、菌体密度的含量，结果表明随着AI-2信号分子强度的增加，菌体密度和PLA含量（1.721-74.204 mg/L）均呈现上升趋势，表明LuxS/AI-2群体感应系统被激活，L. plantarum L3的PLA合成受LuxS/AI-2群体感应系统的调控。 ②LuxS/AI-2 群体感应系统调控L. plantarum L3高产PLA的机制：串联质谱标记（TMT）定量蛋白质组学分析显示，当L. plantarum L3的LuxS/AI-2群体感应系统被激活时，共检测出1291个差异表达蛋白（DEPs），其有516个DEPs上调，包括s-核糖体同型半胱氨酸裂解酶（luxS）及PLA合成的转氨酶（araT）和乳酸脱氢酶（ldh）。与此同时，DEPs在QS途径和PLA合成的苯丙氨酸途径表达上调；当LuxS/AI-2群体感应系统被抑制，L. plantarum L3的AI-2信号分子、菌体密度、PLA含量均逐渐降低。此外，luxS、araT和ldh的表达量降低，导致PLA产量降低。综上所述，luxS、araT和ldh是调控PLA合成的关键蛋白，QS途径和苯丙氨酸途径是PLA合成的关键途径。 |
| 并列题名： | Screening of Lactiplantibacillus plantarum L3 inhibitory substance and its formation mechanism |
| 题名主题： | 植物乳杆菌L3 抑菌物质 苯乳酸 群体感应系统 组学技术 学位论文 |
| 中图分类： | TS2-533 |
| 个人名称等同： | 柴云美 著 |
| 个人名称次要： | 黄艾祥 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |