书目详细信息
： 黄皮疣柄牛肝菌多糖提取、分离纯化及免疫活性与抗氧化活性研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00(估)缴送 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 黄皮疣柄牛肝菌多糖提取、分离纯化及免疫活性与抗氧化活性研究/.郑婷婷著/.范江平指导 |
| 出版发行项： | 2019.6.5 |
| 载体形态项： | 104页:;+图表:;+30cm |
| 提要文摘： | 本文以黄皮疣柄牛肝菌（Leccinum crocipodium(Letellier.) Watliag）为研究对象，首次研究黄皮疣柄牛肝菌多糖的提取，分离纯化，以及体外免疫活性、抗氧化活性，为黄皮疣柄牛肝菌多糖的深入研究以及开发利用提供一定的理论依据。本论文利用响应面法优化了黄皮疣柄牛肝菌多糖的提取工艺；比较分析了水提粗多糖与碱提粗多糖理化性质并且研究水提粗多糖流变学特性；运用AB-8大孔树脂、sevage法、DAEA纤维素DE-52柱层析对水提粗多糖进行了分离纯化，并利用光谱和色谱法初步鉴定了多糖纯化组分；另外通过体外细胞实验和抗氧化实验研究了多糖的免疫活性和抗氧化活性。研究结果如下： 1. 采用热水法提取黄皮疣柄牛肝菌多糖，以提取率为指标，通过单因素试验，选定提取温度、提取时间、液料比，再应用响应面实验优化，确定热水法提取黄皮疣柄牛肝菌多糖最佳工艺条件为：提取时间3.1 h，提取温度51 ℃，液料比34:1（mL/g）。此条件下黄皮疣柄牛肝菌多糖提取率为16.67%。 2. 制备的水提粗多糖（LPS）与碱提粗多糖（LPJ），得率分别为18.44%与5.50 %。对LPS与LPJ的理化性质进行对比分析得出LPS多糖含量，糖醛酸含量，硫酸根含量均高于LPJ。LPS粘度测定结果表明：LPS粘度随浓度、温度、热处理时间、pH值及NaCl添加量的变化而变化，LPS粘度随着浓度的增大而增大；高温可使LPS粘度下降；热处理时间在20~ 40min时间范围内，多糖粘度变化较小，较稳定；强酸或强碱环境对多糖粘度影响较大；添加高浓度的NaCl也会引起多糖粘度的下降。 3. 运用AB-8大孔树脂对LPS进行脱色脱蛋白工艺优化。优化工艺参数为时间5.3h，树脂用量0.07（g/mL），温度53.3℃。按此条件多糖保留率为（92.39±0.82）%，脱色率为（65.77±0.62）%，脱蛋白率为（65.38±0.88）%。通过sevage法对脱色后的多糖液进行脱蛋白处理，减压浓缩，透析冷冻干燥后得精多糖（LCP）。LCP经过DEAE纤维素DE-52柱层析分别用去离子水、0.1M NaCl、0.3M NaCl洗脱分离纯化得到LCP-1、LCP-2、LCP-3三种均一多糖。 4. 通过紫外光谱分析，LCP-1，LCP-2，LCP-3不含核酸、多肽、蛋白质等杂质。高效液相色谱分析黄皮疣柄牛肝菌多糖的单糖组成及摩尔比结果表明：LCP-1由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成。摩尔比为10.66: 0.16: 0.02: 0.12: 0.01: 64.79: 13.78: 0.1: 0.05: 10.31，其中，葡萄糖、半乳糖和甘露糖为LCP-1主要的单糖。LCP-2由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成，摩尔比为21.94: 0.46: 0.5: 3.33: 7.21: 47.21: 3.18: 1.36: 14.81，其中半乳糖、甘露糖和岩藻糖是LCP-2主要的单糖。LCP-3由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成，摩尔比为32.99: 0.09: 0.1: 2.53: 0.01: 4.99: 33.36: 8.62: 0.06: 17.25，与LCP-2相似，半乳糖、甘露糖和岩藻糖为LCP-3主要的单糖。通过凝胶色谱法测定黄皮疣柄牛肝菌多糖相对分子量结果表明：LCP-1有两个色谱峰，色谱峰1与色谱峰2的重均分子量分别为 2.303×105 Da与7.519×103 Da。说明LCP-1可做进一步的分离纯化，LCP-2、LCP-3相比LCP-1均一性较好，重均分子量分别为2.655 ×105 Da与3.783×105 Da。红外光谱分析表明黄皮疣柄牛肝菌多糖LCP-1、LCP-2、LCP-3均具有典型的多糖吸收峰。 5.体外细胞实验结果表明：LCP-1，LCP-2和LCP-3可通过提高巨噬细胞增殖率，吞噬能力，刺激NO和细胞因子（TNF-α, IL-6及IL-1β）的释放增强巨噬细胞RAW 264.7的免疫调节活性。在三种多糖中，LCP-2和LCP-3显示出比LCP-1更好的免疫调节活性。体外抗氧化活性实验结果表明：黄皮疣柄牛肝菌精多糖LCP与三个纯化组分（LCP-1、LCP-2、LCP-3）均具有抗氧化能力，但在各抗氧化体系中表现不一致，LCP表现出较强的清除DPPH、ABTS自由基的能力及还原能力，但在清除羟基自由基、超氧阴离子自由基方面LCP-2优于LCP。三个纯化多糖组分中，LCP-2与LCP-3抗氧化活性优于LCP-1。 |
| 并列题名： | Extraction, Isolation, Purification, Immunological Activity and Antioxidant Activity of Polysaccharide from Leccinum crocipodium (Letellier.) Watliag |
| 题名主题： | 黄皮疣柄牛肝菌多糖 提取 分离纯化 表征 活性 学位论文 |
| 中图分类： | TS2-533 |
| 个人名称等同： | 郑婷婷 著 |
| 个人名称次要： | 范江平 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20200312 |