ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
---|---|
作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 稻瘟菌MoHG1调控糖类和几丁质代谢影响菌株生长的机制/.浦鑫著/.李成云指导 |
出版发行项: | 2023.6.9 |
载体形态项: | 94页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 植物保护学院, 学号2020210298 |
提要文摘: | 稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)被列为世界十大植物致病真菌之首,严重威胁水稻的产量。由于稻瘟菌易开展遗传分析,在生长发育和侵染机制等方面有许多植物病原真菌所共有的特点,因此,稻瘟菌也是研究丝状真菌生长发育和致病机制的模式生物。课题组前期利用基因组关联分析鉴定了一个与稻瘟菌生长相关的新基因MoHG1(Hypha Growth 1 in Magnaporthe oryzae)。该基因敲除后菌株生长和致病力显著降低。基于前期转录组数据分析,本研究继续对MoHG1下游调控代谢通路进行研究,进一步明确该基因调控菌株生长的机制。主要的研究结果如下: 1、本研究构建了不同物种中MoHG1同源序列系统发育树,结果表明不同物种之间变异大,相似性高于85%的仅存在于梨孢属,并且比对的蛋白注释均为假定蛋白,表明该蛋白功能尚不清楚。 2、用不同糖处理△Mohg1敲除菌株发现MoHG1影响稻瘟菌菌落形态且在含有不同糖的CM培养基上两个△Mohg1敲除菌株菌丝的生长速率远低于野生型菌株YN125;利用GCMS(气相色谱质谱联用)测定不同菌株菌丝中糖含量发现,敲除菌株菌丝中乳糖含量显著高于野生型,D-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-山梨醇和木糖醇含量极显著高于野生型。用钙荧光白(CFW)对菌丝几丁质进行染色发现,敲除菌株△Mohg1中的荧光信号分布较少,而野生型菌株YN125分布较多,说明MoHG1可能影响稻瘟菌中几丁质的分布。 3、荧光定量分析结果表明,接种敲除菌株△Mohg1后,水稻OsCEBiP和OsAOS2基因表达量显著低于接种野生型菌株,水稻OsMPK6、OsMPK12、OsNH1、OsSID2、OsJAZ8、OsEDS1、OsPAD4和OsEIN基因表达量显著高于接种野生型菌株。利用GFP标记MoHG1蛋白,发现MoHG1-GFP荧光蛋白在稻瘟菌的菌丝、分生孢子和侵染过程中主要出现在细胞质上,没有观察到其分泌到胞外。 4、本研究将其中21个糖类和几丁质代谢相关且显著下调的基因编码区通过酵母重组技术连接到过表达载体pYF11中,用原生质体-PEG方法将其转入△Mohg1敲除菌株中,成功获得这21个基因的过表达菌株。筛选出5个菌丝生长恢复和野生型一致的突变菌株,分别是MGG_08811、MGG_03620、MGG_00623、MGG_07704和MGG_07442的过表达菌株。 5、对过表达菌株相关生物学功能进行测定发现,候选基因过表达促进了敲除菌株△Mohg1在不同时间点上、含有不同浓度细胞壁压力胁迫剂(600 μg/mL CR、0.01% SDS和4μg/mL CFW)和不同浓度渗透压胁迫剂(0.2M KCl、0.2M NaCl和0.1M Sorbitol)的PSA培养基上的菌丝生长;过表达菌株中的荧光信号分布多,与野生型菌株YN125一致,但敲除菌株△Mohg1中的荧光信号分布较少;过表达菌株中产孢量和附着胞形成率都极显著降低;△Mohg1敲除菌株处理的水稻比野生型菌株YN125处理的水稻发病轻,而过表达菌株的处理的水稻比敲除菌株△Mohg1处理的水稻发病更轻。说明MoHG1可能通过糖类和几丁质代谢通路影响稻瘟菌的菌株生长和致病过程。本研究通过差异基因表达和代谢物变化两方面说明MoHG1影响了MGG_08811、MGG_03620、MGG_00623、MGG_07704和MGG_07442表达从而影响菌丝生长进而影响致病力。 |
并列题名: | The mechanism of MoHG1 regulating carbohydrate and chitin metabolism affecting the growth of Magnaporthe oryzae eng |
题名主题: | 稻瘟菌 糖类 几丁质 菌株生长 致病力 学位论文 |
中图分类: | S435.111.1-533 |
个人名称等同: | 浦鑫 著 |
个人名称次要: | 李成云 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240516 |