ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 猪圆环病毒2型云南株的分离鉴定及全基因组序列分析/.朱丽著/.张以芳,周晓黎指导 |
出版发行项: | 2019.5.28 |
载体形态项: | 61页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 猪圆环病毒2型是引起猪免疫抑制,导致继发感染的重要病毒。自2000年我国首次报道以来,该病在我国普遍流行,给我国养猪业造成很大的威胁。本研究旨在明确PCV2在云南省的流行规律,为其免疫进化提供科学依据;对PCV2分离鉴定,明确其遗传变异、分子进化,为其防治提供科学基础;构建病原学与流行病学数据库,并为其疫苗株筛选及防治提供科学依据。 1. 应用PCR方法对采集的云南部分地区2016~2018年共246份疑似PCV2感染猪的病料组织进行病原检测,结果显示:在2016年采集的27份病料中,17份为阳性,阳性率为62.97%;2017年采集了126份,71份为阳性,阳性率为56.35%;2018年采集了93份,61份为阳性,阳性率为65.59%;在采集的一共246份病料中,149份样品检测结果为阳性,阳性率为60.57%。运用qPCR方法对149份经PCR检测鉴定为阳性的病料进行检测,滤过液含毒量为1.02×102-3.59×107copies/μL,表明近年来,在云南地区,PCV2感染较为普遍。 2.按照不同年份不同地域选取其中含毒量较高由1.37×104-3.59×107copies/μL的30份病料,接种PK-15细胞进行分离培养,通过对细胞培养病毒提取DNA进行PCR、测序和间接免疫荧光染色鉴定,成功分离出14株PCV2,毒株序列已上传NCBI;运用间接免疫荧光测得14个毒株第10代的TCID50从103.625到104.875/0.1mL不等。 3.全基因序列分析发现,14株毒株主要有3种亚型,有2株属于PCV2a,占分离株的 14.29%;1株属于PCV2b,占分离株的 7.1%;剩余的11株属于PCV2d,占分离株的 78.6%,表明云南部分猪场中3种基因亚型的共同存在且PCV2d存在优势;分离到的14株PCV2毒株与国内外参考毒株的同源性很高,不同地域的全基因组序列同源性高,说明变异很小;其中ORF2序列的同源性低于全基因及OFR1的同源性;通过氨基酸位点分析,Rep蛋白存在17个氨基酸残基突变位点,Cap蛋白存在14个氨基酸残基突变位点,不同亚型之间Cap蛋白表现出其亚型特有的氨基酸序列;选择压力分析显示Cap蛋白的表位区域有4个氨基酸位点处于正向选择,正向选择压驱使着PCV2b和PCV2d的进化,证实病毒在不断进化。 |
并列题名: | Isolation and identification of porcine circovirus type 2 yunnan strain and Whole genome sequence analysis |
题名主题: | 猪圆环病毒2型 全基因组 分离鉴定 序列分析 学位论文 |
中图分类: | S852.65-533 |
个人名称等同: | 朱丽 著 |
个人名称次要: | 张以芳 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |