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： 表儿茶素对C2C12细胞胰岛素抵抗的影响研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 表儿茶素对C2C12细胞胰岛素抵抗的影响研究/.宋羚著/.马啸指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.26 |
| 载体形态项： | 43页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 茶学院, 学号2020210215 |
| 提要文摘： | 表儿茶素（Epicatechin，EC）是一种水溶性的天然有机化合物，广泛存在于茶叶、可可、水果等农作物中。EC属于黄烷醇类化合物，具有多种生理活性，例如抗炎、抗氧化、线粒体疾病治疗、预防心血管疾病等。二型糖尿病作为一种在世界范围内危害人类健康的重大疾病，其相关发病机制的研究目前仍然不完善。近年来，研究发现胰岛素抵抗（Insulin resistance，IR）是二型糖尿病发生的关键性因素。胰岛素在机体中作用的三个关键靶组织分别为：骨骼肌、肝脏和脂肪组织。在骨骼肌中，胰岛素通过增加葡萄糖转运和糖原合成来促进葡萄糖的利用和储存。因此，研究如何改善C2C12成肌细胞IR对二型糖尿病的治疗具有一定的基础研究价值。此外，二型糖尿病与氧化应激损伤也有较为密切的关系。所以，本文以EC为研究对象，通过棕榈酸（Palmitic acid，PA）诱导C2C12成肌细胞建立胰岛素抵抗细胞模型，评价其体外降糖效果，明确EC调控糖代谢的生物活性，从基础研究视角为二型糖尿病的治疗提供新思路。主要结果如下： （1）通过噻唑蓝（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide，MTT）法测定不同浓度的EC对C2C12成肌细胞活力的影响，筛选浓度为200、400、800 μmol/L的EC进行实验。苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin，HE）染色法观察细胞形态，鉴定C2C12细胞成功分化为C2C12成肌细胞。使用PA成功建立胰岛素抵抗细胞模型。通过葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量，蒽酮法检测糖原含量，结果表明EC能显著增加C2C12细胞葡萄糖消耗量和糖原含量。 （2）检测EC对C2C12细胞氧化指标的影响。结果表明EC能够升高C2C12细胞中过氧化氢酶（Catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）的水平，降低C2C12细胞中一氧化氮（Nitric oxide，NO）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、活性氧（Reactive oxygen species，ROS）的水平，提示EC对C2C12细胞氧化应激损伤具有修复作用。 （3）测定EC体外抗氧化活性。结果显示EC对DPPH+自由基清除率、ABTS+自由基清除率、Fe3+还原能力均随质量浓度的增加而升高，表明EC的体外抗氧化活性较强。 （4）使用流式细胞术检测细胞凋亡情况。EC能够显著降低C2C12细胞凋亡率，提示EC可以通过降低细胞凋亡率从而缓解细胞氧化应激损伤。 （5）通过蛋白免疫印迹法（Western blot，WB）评价EC对C2C12细胞胰岛素信号通路和氧化应激信号通路的调控作用。EC处理后使C2C12细胞葡萄糖转运体4（Glucose transporter 4，GLUT4）蛋白水平上调；磷脂酰肌醇-3-激酶（Phosphoinositide-3-kinase，PI3K）/丝氨酸/苏氨酸激酶（Serine / threonine kinase，AKT）/哺乳动物雷帕酶素靶蛋白（Mammaliantar get of rapamycim，mTOR）信号通路激活；腺苷酸激活蛋白激酶（Adenosine 5＇-monophosphate -activated protein kinase，AMPK）/乙酰辅酶A羧化酶（Acetyl-CoA carboxylase，ACC）信号通路激活；氧化应激信号通路核因子红细胞2相关因子2（Nuclear factor erythroid 2-related factor 2，NRF2）/血红素加氧酶-1（Heme oxygenase 1，HO-1）激活。这表示EC改善C2C12成肌细胞IR是通过调节细胞氧化应激信号通路、激活胰岛素依赖性及胰岛素非依赖性信号通路，增强GLUT4向IR细胞质膜的易位，以增加IR条件下细胞对葡萄糖的摄取。 综上所述，EC对C2C12成肌细胞IR具有明显的改善作用，其机制为调节NRF2/HO-1信号通路，修复氧化应激损伤，缓解细胞凋亡；增加糖原合成，激活PI3K/AKT/mTOR信号通路，上调GLUT4表达和易位的能力，活化AMPK/ACC途径，增强细胞对葡萄糖的摄取。此研究可为糖尿病及相关疾病的治疗提供参考数据，也为今后茶叶资源的开发利用提供新思路。 |
| 并列题名： | Study on the effect of epicatechin on insulin resistance in C2C12 cells |
| 题名主题： | 表儿茶素 C2C12成肌细胞 胰岛素抵抗 氧化应激 天然产物 学位论文 |
| 中图分类： | S571.1-533 |
| 个人名称等同： | 宋羚 著 |
| 个人名称次要： | 马啸 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |