ISBN/价格: | CNY20.00 (估)学位论文 |
---|---|
作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 植物内生真菌印度梨形孢(Piriformospora indica)的发酵培养及其促生作用/.刘雪梅著/.谢勇, 徐健指导 |
出版发行项: | 2021.6.11 |
载体形态项: | 46页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 植物保护学院, 学号2018250071 |
提要文摘: | 植物内生菌生长在植物的内部,在增强农作物抗病、抗虫、抗非生物胁迫方面具有重要作用。P.indica是具有广泛定殖能力的植物类菌根菌类植物内生真菌。P.indica通过共生定殖多种寄主植物根系胞间和胞内,表现出促进植物生长,诱导植物产生系统抗性、提高植物对逆境胁迫忍耐性等多种功能,是一种具有广泛应用价值的植物内生真菌。加强植物内生真菌的发酵培养和抗病、增产应用研究,推进植物内生真菌产业开发进程,对农业微生物资源的挖掘和利用、保障现代农业安全、高效、可持续发展具有重要意义。本研究针对性开展了植物内生真菌P.indica的筛选,通过营养代谢、生长条件分析进行了分离内生真菌的发酵培养,进一步明确了人工培养内生真菌P.indica的定殖促生、促生增产作用。主要取得如下研究成果: 1、油菜根系分离筛选了植物内生真菌,分子生物学鉴定为印度梨形孢P.indica 通过不同植物根际内生真菌的定殖观察和检测、选择性培养基筛选,自油菜幼苗植株根系皮层组织分离获得一株植物内生真菌。该内生菌能够在PDA培养基上呈现环形结构生长,菌丝附着在培养基的表面,中央脐状隆起。新生菌丝颜色呈白色,随培养时间的延长而呈现浅黄色并逐渐加深。菌丝透明有隔,直径0.8-2.6 µm,老龄菌丝呈现珊瑚状不规则膨胀,端部形成大小为14-24 µm × 6-13 µm梨形厚垣孢子。PCR扩增596 bp和1276 bp 的ITS和tef序列,与P.indica序列同源性达100 %,tef聚类分析与P.indica聚为一簇,结合形态学特征,鉴定分离内生真菌为Piriformospora indica,属担子菌门(Basidiomycota)、层菌纲(Agaricomycetes)、蜡壳耳目(Sebacinales)、蜡壳耳科(Sebacinaceae)、梨形孢属(Piriformospora)。 2、分析优化了P.indica 培养基和培养条件,完成了P. indica的发酵培养 分离内生菌P.indica的营养需求属于寡营养型,在含有1 %葡萄糖的培养基中就能生长。不同C/N源单因子筛选试验表明,适宜的C、N源有利于促进P.indica菌丝体生长,提高生物量。P.indica对有机C/N源的利用效率高于无机C/N源,初步筛选出N3和C3作为P.indica的最佳发酵培养N源和C源。采用交叉试验筛选了P.indica发酵配方,以M-A、M-F较适合菌丝体生长,其中以M-F生长速度最快,摇瓶试验生物量达 0.91 %。P.indica培养适宜温度为25 ℃,pH弱酸至中性。P.indica兼性好氧,溶氧量的大小不仅影响到菌体的生长速度,充足的溶氧量有利于芽孢的形成。营养菌丝体、2 %以上接种量有利于缩短发酵培养周期。利用200 L-2000 L二级发酵体系,采用二次接种法,控制培养温度25 ℃,起始pH 7.0,装液系数0.6,通气量0.1 m3/min,罐压维持在0.1 MPa,发酵培养生物量最高达0.55 %。 3、明确了发酵培养P. indica的定殖共生和促生作用,开展了内生菌促进西瓜生长的田间试验 P. indica定殖共生试验表明,发酵培养的P.indica能够在草莓、油菜、西瓜、辣椒植物根际定殖共生,根系皮层组织可显微观察到定殖孢子并扩增到P.indica 84 bp的特性DNA片段。不同植物上的定殖能力有一定差别,可能与植物根系的木质化程度相关。P.indica定殖共生促进了植物的生长和产量提高。不同浓度处理油菜苗期生长量分别比对照增加了65.3 %-92.7 %,400 X处理草莓根系、地上部分生长量较对照分别增加了12.7 %和64.6 %。以辣椒为试验对象的产量试验结果表明,P.indica蘸根移栽可以促进花期提早,增加坐果率,辣椒果型增大,单果重量达176.6 g,较对照提高了25.7 %,单株产量达4.67 kg,较对照产量提高了7.68-11.95 %。在江西南昌的红壤旱地上,P. indica处理后西瓜实际产量和含糖量比常规对照分别提高了18.1 %和21.5 %。在淮安市盱眙县马坝镇高坝村西瓜田试验,增产率分别为15.15 %和28.87 %。 |
并列题名: | Fermentatal cultivation of endophytic fungus, Piriformospora indica, and its growth promoting effect |
题名主题: | 印度梨形孢 分离鉴定 发酵培养 促生作用 学位论文 |
中图分类: | S182-533 |
个人名称等同: | 刘雪梅 著 |
个人名称次要: | 谢勇 指导 |
个人名称次要: | 徐健 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20220615 |