ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 芳香化酶和促性腺激素受体在大刺鳅性腺成熟过程中的表达规律/.袁茵著/.毕保良指导 |
出版发行项: | 2023.5.14 |
载体形态项: | 66页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物科学技术学院, 学号2020210391 |
提要文摘: | 大刺鳅(Mastacembelus armatus)在人工繁殖过程中经常出现性别比例失调、性腺发育异常等现象,严重制约了大刺鳅的人工繁殖效率。已有研究证实,芳香化酶(CYP19)和促性腺激素受体(gonadotropins receptor)都参与类固醇激素生物合成途径,在性别分化和性腺发育过程中发挥着至关重要的作用。目前,已在不同的硬骨鱼中鉴定出芳香化酶和促性腺激素受体,但是在大刺鳅性腺发育过程中的作用机制以及所涉及到的调控关系仍然十分有限。本研究通过组织学分析获得大刺鳅Ⅱ期未成熟和Ⅳ期成熟性腺样本,对不同时期的精巢和卵巢进行转录组和miRNA高通量测序,分析其成熟过程中转录本的变化规律;首次制备出大刺鳅脑型芳香化酶(Cyp19b)单克隆抗体,并分析了性腺成熟过程中性腺型芳香化酶(Cyp19a)和Cyp19b蛋白水平的变化规律;克隆获得大刺鳅cyp19a、cyp19b、黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体(lhcgr1和lhcgr2)的核心编码序列以及lhcgr1和lhcgr2的3’非翻译区(3’UTR),预测并鉴定了调控lhcgr1和lhcgr2的miRNA。本研究有助于探讨大刺鳅特有的性别决定与性腺发育等生理过程,为揭示大刺鳅生殖机理提供重要的理论依据。具体研究结果如下: (1)对大刺鳅性腺转录组分析结果显示,富集到68个与性腺发育相关的GO term,包括对促性腺激素的细胞应答(cellular response to gonadotropin stimulus, GO: 0071371)、对糖皮质激素的应答(response to glucocorticoid, GO: 0051384)、生殖发育过程(developmental process involved in reproduction, GO: 0003006)等;富集到6个与性腺发育直接相关的KEGG信号通路,包括类固醇激素生物合成(Steroid hormone biosynthesis)、细胞色素P450代谢(Drug metabolism-cytochrome P450)、胆固醇代谢途径(Cholesterol metabolism)、松弛素信号通路(Relaxin signaling pathway)和卵巢类固醇生成(Ovarian steroidogenesis);进一步筛选获得细胞色素P450超家族成员(cyp17a1、cyp11a1和cyp19a1)和羟基类固醇脱氢酶(hsd17b3、hsd11b2和hsd17b1)等26个与性腺发育密切相关的候选基因。 (2)大刺鳅基因组中存在芳香化酶基因的2个亚型,即Cyp19a和Cyp19b。Cyp19a蛋白在卵巢中的表达量高于精巢中,但Cyp19b仅在脑中检测到表达。大刺鳅性腺未成熟时,cyp19a的表达量在Ⅱ期精巢和卵巢间无明显差异,而达到性成熟时,卵巢中的表达量显著高于精巢中(P<0.05);Ⅳ期卵巢中的表达量约为Ⅱ期卵巢表达量的40倍。 (3)大刺鳅基因组中存在黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体2个亚型,即Lhcgr1和Lhcgr2。lhcgr1在各组织中均有不同程度的表达,但lhcgr2仅在成熟性腺中具有较高的表达量。qPCR和转录组的结果显示,随卵巢从Ⅱ期发育至Ⅳ期,lhcgr1和lhcgr2的表达量显著升高(P<0.05),lhcgr1在Ⅳ期卵巢中的表达量显著高于Ⅳ期精巢中(P<0.05),而lhcgr2在Ⅱ期卵巢中的表达量显著低于Ⅱ期精巢中(P<0.05)。 (4)克隆获得大刺鳅lhcgr1和lhcgr2的3’UTR,发现可能调控大刺鳅lhcgr1的miRNA有33个,调控lhcgr2的miRNA有28个。其中,miR-30-y 和miR-737-x均与lhcgr1和lhcgr2 的3’UTR结合,miR-9-z只与lhcgr2 的3’UTR结合。miRNA表达量分析结果显示,随性腺从Ⅱ期发育至Ⅳ期,miR-30-y 的表达量在卵巢和精巢发育过程中均升高;miR-737-x的表达量仅在精巢的发育过程中升高,卵巢发育成熟的过程中无显著性变化;miR-9-z在卵巢发育过程中表达量降低,而精巢在发育过程中表达量升高。 |
并列题名: | Expression profiles of aromatase and gonadotropin receptor during gonadal maturation in Mastacembelus armatus |
题名主题: | 芳香化酶 黄体生成素受体 性腺发育 转录组 miRNA 学位论文 |
中图分类: | S917.5-533 |
个人名称等同: | 袁茵 著 |
个人名称次要: | 毕保良 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |