ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 我国部分地区牛冠状病毒流行病学调查和S基因遗传进化分析/.张欣怡著/.肖啸,李晓成指导 |
出版发行项: | 2023.6.1 |
载体形态项: | 72页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物医学院, 学号2020210417 |
提要文摘: | 牛冠状病毒(BCoV)是导致我国牛腹泻和呼吸系统疾病的主要病原之一,严重影响了全球养牛业的健康发展。该病毒可以感染牛,还能感染羊、野生反刍动物、猫甚至人,对该病毒的研究具有重要的公共卫生意义。本研究针对我国部分省份牛群感染BCoV情况进行流行病学调查,对流行毒株的S基因及全基因组序列进行扩增分析,掌握我国牛群BCoV感染状况及分布特点,明晰流行毒株S基因及全基因组分子特征及遗传演化规律,以期为BCoV相关疫病的防控提供科学依据。 1. BCoV流行病学调查:应用本实验室建立的BCoV实时荧光定量RT-PCR方法对2021-2022年采集自16个省份(直辖市/自治区)68个养牛场的1153份临床样品进行检测,阳性场占比为41.18%(28/68),阳性样品占比为10.49%(121/1153)。其中,临床健康牛群阳性场占比为36.36%,临床发病牛群阳性场占比为42.86%;发病牛群中,腹泻症候群阳性场占比为37.5%,呼吸道疾病症候群阳性场占比为50%。按牛只生长阶段来看,犊牛阳性个体检出率为20.68%,显著高于青年牛(0.15%)和成年牛(3.09%);按季节分布来看,夏(14.93%)、冬(11.28%)两季占比较高,春(7.22%)、秋(7.36%)两季占比相对较低;按地理分布来看,东北、华南、华中地区阳性场占比较高,分别为69.23%、62.5%、50%,华北、华东、西北、西南地区阳性场占比相对较低,分别为25%、25%、17.65%、16.67%。可见,我国牛群感染BCoV现象普遍且广泛,在时间、空间、群间三个维度上均存在差异性分布特点。 2. BCoV S基因扩增分析:针对BCoV S基因序列设计7对特异性引物,用RT-PCR对BCoV阳性样品进行S基因分段扩增,共获得30条S基因序列。测序毒株核苷酸同源性介于97.7%-100%之间,氨基酸同源性介于97.2%-100%之间;测序毒株与GenBank上已发布的BCoV S基因参考序列核苷酸同源性介于96.7%-99.8%之间,氨基酸同源性介于95%-99.9%之间。系统进化分析表明,BCoV 毒株分为欧洲(GI 型)和亚-美(GII 型)两大分支,所测毒株均属GII 型,且与大多中国参考毒株共同位于GII 中相对独立的分支。与中国已发布的参考毒株相比,所测毒株在42个氨基酸位点处存在点突变,毒株遗传演化的地域性特点较为明显,相同地区毒株S序列存在多处相同且有别于其他地区毒株的氨基酸突变,结果表明某些毒株可能拥有相同的祖先。 3. BCoV全基因组扩增分析:以GenBank中发布的BCoV参考毒株BCOV-China/SWUN/A1/2018(登录号:MN982198)全基因组序列为模板,设计31对特异性引物,用RT-PCR对BCoV阳性核酸进行全基因组的分段扩增,通过优化引物序列及反应温度等条件,最终从2021年来自宁夏回族自治区的牛粪便样品中扩增获得1条完整的BCoV全基因组序列,命名为BCoV/NX-1/2021/CHN。经序列比对和遗传进化分析,该毒株为BCoV,与BCoV参考毒株基因组序列核苷酸同源性为97.7%-99.5%。该毒株结构蛋白HE、S、E、M、N与BCoV3/2021/CHN、BCoV6/2021/CHN、BCoV_China/BCoV cattle_F226/2021毒株氨基酸同源性较高,结构蛋白的主要变异发生于HE和S蛋白。 综上,本研究通过对我国部分地区牛群BCoV感染情况进行了流行病学调查及S基因的遗传进化分析,结果显示,BCoV在我国临床发病牛群及健康牛群中感染均较为普遍,病毒在呼吸道疾病症候群和腹泻症候群中均发挥着重要作用,犊牛最为易感。我国BCoV流行毒株S基因在进化上呈现地域性聚集特点,S蛋白氨基酸变异存在多样性,且这种多样性与地域相关,与症候群、年份无明显关联。本研究揭示了我国牛群BCoV感染状况和分布特点,丰富了BCoV流行病学数据库,为深入开展BCoV分子流行病学研究提供了参考,为BCoV相关疫病的防控提供了流行病学依据。 |
并列题名: | Epidemiological investigation of bovine coronavirus and analysis of S gene genetic evolution in some parts of China |
题名主题: | 牛冠状病毒 流行病学调查 遗传进化分析 学位论文 |
中图分类: | S855.3-533 |
个人名称等同: | 张欣怡 著 |
个人名称次要: | 肖啸 指导 |
个人名称次要: | 李晓成 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |