ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 云南省猪捷申病毒的分离鉴定及遗传进化分析/.蔡懿琳著/.李文贵指导 |
出版发行项: | 2023.5.29 |
载体形态项: | 72页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物医学院, 学号2020210409 |
提要文摘: | 猪捷申病毒(porcine teschovirus,PTV)属于小RNA病毒科肠道病毒属的一员,包含13个血清型,是感染猪群的重要疫病之一。PTV感染后可通过损害猪的中枢神经系统从而引起共济失调,肢体麻痹和肌肉抽搐等相关的神经症状,此外还能引起繁殖障碍、肺炎、心肌炎和腹泻等多种症状。目前PTV已广泛传播至亚洲、美洲、非洲和大洋洲,虽然我国尚未出现PTV大范围流行情况,但已有部分省市陆续检测到捷申病毒,且常与其他腹泻病毒存在混合感染,存在潜伏性,应当引起养猪业的重视。 研究通过设计PTV检测引物对云南地区猪场感染情况进行调查,结果显示PTV阳性率为 34.09%,同一猪场存在不同基因型的PTV感染,区域流行性不明显。同时建立PTV、PSV、PEDV三重RT-PCR检测方法,对样品PTV、PSV和PEDV混合感染情况进行调查。结果显示,存在PTV +PSV混合感染检出率8.33%(11/132),PEDV +PTV检出率6.82%(9/132),PEDV +PSV检出率为3.79%(5/132),PTV +PSV +PEDV三种病毒混合感染的检出率为1.51%(2/132)。 为分析云南省PTV的遗传变异和进化关系,本研究将阳性样品接种于PK-15细胞,连续传代后成功分离到一株PTV毒株,并对其进行毒力测定,结果显示该毒株TCID50为3.16×107 /mL。同时,设计7对特异性引物完成了该毒株的全基因组序列扩增,并命名为YN01-2023株,全基因组核苷酸序列长6987 bp,编码2329 aa。系统进化树分析显示,该毒株与PTV-4型处于同一分支,亲缘关系较近。重组分析结果显示YN01-2023株的主要亲本为湖南毒株PTV-9 HuN1,次要亲本为PTV-4 Vir 918-19/85。YN01-2023株衣壳蛋白P1基因全长2576 bp,编码859aa,比较其与同一分支上的4株参考毒株同源性,结果显示,YN01-2023株P1蛋白与国内分离的PTV-4 HuN21株(MF170925)核苷酸序列同源性最高。蛋白质二级结构预测结果,P1蛋白为中柔性、低亲水性蛋白,其衣壳蛋白优势抗原表位处于VP1片段。 为探究PTV与宿主细胞间的相关炎症反应机制,本研究运用荧光定量RT-PCR技术,测定和分析PTV感染PK-15细胞后,相关炎性细胞因子IL-6、IL-8、IFN-β和TNF-α 的mRNA转录水平在6、12、24、48和72 h的变化。结果显示,IL-6、IL-8和IFN-β 的mRNA表达水平在PTV病毒感染后均表现为先上调在显著下调,TNF-α的mRNA表达水平在病毒感染后迅速下调。 |
并列题名: | Isolation, identification and genetic evolution analysis of porcine teschovirus in Yunnan Province |
题名主题: | 猪捷申病毒 分离鉴定 遗传进化分析 三重RT-PCR 炎性细胞因子 学位论文 |
中图分类: | S858.28-533 |
个人名称等同: | 蔡懿琳 著 |
个人名称次要: | 李文贵 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |