ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 岩白菜中熊果苷合酶基因的克隆及表达研究/.林凯著/.郭凤根指导 |
出版发行项: | 2019.6.4 |
载体形态项: | 47页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 熊果苷(arbutin)具有美白、抗菌消炎、抗氧化等作用,是众多美白类化妆品的主要原料,具有多方面的开发利用价值。岩白菜[Bergenia purpurascens (Hook. f. et Thoms.) Engl.]为虎耳草科(Saxifragaceae)岩白菜属(Bergenia)的多年生药用植物,是国内天然熊果苷含量最高的植物资源之一,但关于岩白菜中熊果苷的生物合成途径和调控机制尚未见报道。本文从岩白菜转录组数据库中筛选得到1条参与熊果苷生物合成的关键酶候选基因,据此开展了基因克隆、生物信息学分析、原核表达、亚细胞定位、基因表达模式和熊果苷含量分析等研究工作,为揭示岩白菜中熊果苷的生物合成途径及其调控机制奠定了基础。具体研究结果如下: 1. 对岩白菜UGT进行聚类树系分析,得到BpUGT聚类树系图,并从中筛选到岩白菜熊果苷合酶基因的cDNA序列BpUGT68032。据此信息克隆了全长序列,命名为BpAS1(GenBank 号:MX571450)。对BpAS1编码多肽进行了分子量、疏水性、蛋白跨膜区、保守结构域、亚细胞定位等生物信息学预测分析。 2.构建BpAS1的原核表达载体并进行重组表达,SDS-PAGE检测发现重组蛋白大小约为92 kDa,与预期分子量大小相符。 3.岩白菜8个不同部位间在熊果苷含量上存在极显著差异,由高到低的顺序为成熟叶 > 老叶 > 幼叶 > 叶柄 > 一年生根状茎 > 三年生根状茎 > 二年生根状茎 > 根,其主要积累部位为叶片;各部位的8个不同采收时期间在熊果苷含量上也存在极显著差异,其积累高峰在秋季。 4.应用荧光定量PCR法对BpAS1进行的表达模式分析结果表明BpAS1的地下部位表达量显著高于地上部分表达量,说明BpAS1主要在地下部位表达。 5. 蛋白亚细胞定位结果显示BpAS1未定位在叶绿体中,进一步支持了荧光定量PCR的结果,即BpAS1在地下部位表达。 综上所述:岩白菜中熊果苷在地上部位积累,熊果苷合酶基因BpAS1在地下部位表达。 |
并列题名: | Cloning and Expression of Arbutin Synthase Gene in Bergenia purpurascens |
题名主题: | 岩白菜 熊果苷合酶基因 基因克隆 生物信息学分析 表达分析 学位论文 |
中图分类: | Q786-533 |
个人名称等同: | 林凯 著 |
个人名称次要: | 郭凤根 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |