书目详细信息
： 大蒜根际硫醚类化合物诱导辣椒疫霉菌细胞程序性死亡抑菌机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 大蒜根际硫醚类化合物诱导辣椒疫霉菌细胞程序性死亡抑菌机制研究/.李颖著/.王海宁, 刘屹湘指导 |
| 出版发行项： | 2022.06.16 |
| 载体形态项： | 80页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 植物保护学院,学号2019210234 |
| 提要文摘： | 非寄主植物根系“attract-kill”控疫病模式是多样性种植控制土传病害重要的化感机制。大蒜/辣椒作为典型的模式之一，硫醚类化合物是大蒜根系干扰辣椒疫霉菌侵染过程的关键抑菌物质，抑菌过程激活了活性氧爆发和细胞程序性死亡（凋亡和自噬）信号通路。本文探究了硫醚类化合物诱导辣椒疫霉菌活性氧和细胞程序性死亡的抑菌作用，明确硫醚类化合物诱导辣椒疫霉菌细胞程序化死亡的关键调控基因。主要结果如下： 1、验证了非寄主作物间作体系天然活性产物干扰疫霉菌侵染过程的能力，发现硫醚类化物DADS和DATS以及萜烯类化合物柠檬烯能够显著地抑制孢子萌发。构建硫醚类化合物诱导辣椒疫霉菌活性氧爆发、细胞凋亡和细胞自噬的荧光染色方法，明确了DCFH-DA、MDC、Hoechst 33342/PI为辣椒疫霉菌活性氧爆发、细胞自噬、细胞凋亡的适宜荧光染色剂。证明硫醚类化合物抑制辣椒疫霉菌过程中会引起辣椒疫霉菌活性氧爆发、细胞凋亡和细胞自噬。 2、筛选出辣椒疫霉菌活性氧和细胞程序性死亡抑制剂，确定活性氧清除剂GSH、TCPOBOP、MRT68921HCL分别做为活性氧、细胞凋亡、细胞自噬研究中的抑制剂，添加抑制剂后硫醚类化合物对疫霉菌抑制效果的缓解率达到了15.24%，20.17%，12.32%，明确活性氧爆发和细胞程序化死亡在硫醚类抑菌的重要功能。 3、通过qRT-PCR验证并筛选出四个关键候选基因Pc570505、Pc507795、Pc545159、Pc132666进行机制研究，采用CRISPR/Cas9基因编辑技术，对候选基因进行功能验证，获得杂合子ΔPc570505和ΔPc507795，与凋亡负相关基因ΔPc570505菌丝生长速率低于野生型菌株；相比较于野生型，与自噬正相关基因敲除ΔPc507795在硫醚类化合物的处理下表现出比野生型更好的生长态势，验证了自噬相关基因是硫醚类化合物诱导自噬抑制辣椒疫霉菌的重要基因。采用基因过表达技术获得ΔPc545159和ΔPc132666，在硫醚类化合物的处理下，相比于野生型，活性氧爆发基因过表达ΔPc132666-4菌丝抑制率低于野生型菌株，活性氧清除基因过表达ΔPc545159-2菌丝抑制率显著低于野生型菌株。 综上所述，本论文构建了辣椒疫霉菌活性氧、细胞凋亡和自噬的染色方法，验证了活性氧、细胞程序性死亡在硫醚化合物干扰辣椒疫霉菌侵染过程的作用，筛选并研究基因Pc570505、Pc507795、Pc545159、Pc132666在硫醚类化合物介导辣椒疫霉菌细胞程序性死亡的功能。 |
| 并列题名： | Study on the inhibitory mechanism of programmed cell death indeuced by sulfide compounds from garlic rhizosphere in Phytopthora capsici eng |
| 题名主题： | 辣椒疫霉菌 硫醚类化合物 活性氧 细胞程序性死亡 基因编辑 学位论文 |
| 中图分类： | S436.33-533 |
| 个人名称等同： | 李颖 著 |
| 个人名称次要： | 王海宁 指导 |
| 个人名称次要： | 刘屹湘 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20230425 |