ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 秋海棠碎色病毒(BFBV)生物学特性及基因组特征/.唐艺榕著/.吴红芝指导 |
出版发行项: | 2020.06 |
载体形态项: | 49页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 园林园艺学院 |
提要文摘: | 秋海棠碎色病毒(Begonia flower breaking virus;BFBV)是2005年首次在四季秋海棠(Begonia semperflorens)上发现的一种马铃薯Y病毒属(Potyvius)的新病毒。之后相继在虎斑秋海棠秋海(Begonia bowerae)和Begonia odorata上发现该病毒,BFBV引起秋海棠花色碎裂、叶面肿胀或变形、褪绿环斑等症状。秋海棠属(Begonia)植物是花卉当中的名花,它兼有月季、牡丹、茶花等名花的色、香、姿、韵,具有极高的观赏价值,BFBV的侵染对其经济价值和观赏价值造成严重影响,但人们对BFBV病毒的特征还知之甚少。本研究以前期鉴定感染BFBV的虎斑秋海为材料,采用转录组测序分析方法,获得病毒基因组全序列,并对基因组结构进行分析,进一步明确了该病毒的分类地位。在此基础上,对该病毒的寄主范围、粒子形态、血清学反应等特性及组织培养脱毒技术进行了研究。取得的研究结果如下: (1)虎斑秋海棠BFBV组培脱毒技术及无毒秋海棠组培苗的获得,以感染BFBV的虎斑秋海棠(Begonia bowerae)的叶片为材料,叶片诱导丛生芽的最佳培养基配方为MS+0.5 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA,诱导率为93.3;继代增殖的最佳培养基配方为MS+0.5 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA,增殖倍数为5.97;茎尖生长点诱导成苗培养基为:MS+6-BA 0.1mg/L+NAA0.05mg/L;适宜脱毒的茎尖大小为0.5~0.8mm,成活率和脱毒率分别为63.33%、66.67%;组培苗的最佳生根培养基为1/2MS+0.mg/LNAA,平均根条数为12.07,根毛多,且粗壮,植株生长健壮,叶片浓绿。 (2)病毒的分离纯化及粒子形态,将BFBV病叶汁液摩擦接种于单斑寄主心叶烟上,重复进行多次单斑分离,初步纯化病毒。初步纯化的病毒在心叶烟上扩繁,采集心叶烟进行病毒粒子提纯,在EM100CX-Ⅱ型透射电镜下看到线状的病毒粒子。 (3)寄主范围测定,以8个科的17种植物进行生物寄主鉴别试验,结果表明:BFBV可以侵染茄科、豆科、葫芦科和旋花科这4个科的6种植物。其中在茄科的心叶烟上表现局部枯斑症状,三生烟上表现系统斑点症状;在葫芦科的黄瓜上表现出系统斑块,在西葫芦上表现出系统黄化;在豆科的大豆上表现系统斑症状;在旋花科的牵牛花上表现出叶片黄化。 (4)病毒全基因序列,通过RNA-seq转录组测序分析获得病毒的5’-UTR至CP区域约9.6k的序列,根据所得序列利用NCBI设计基因组扩增引物,每个引物片段的末端设计有大约150-200 nt的重叠区域,结合马铃薯病毒组3’端简并引物扩增得到缺失的3’端序列,从而确定病毒基因组全长序列。试验结果表明:BFBV YN-Tiger分离物的完整核苷酸序列长度为9540bp,包含105bp 5’非编码区(UTR)和216bp 3’UTR,不包括poly(A)尾(GenBank登录号MF509898);其基因组组织和结构是典型的马铃薯Y病毒,包含编码3073个氨基酸多蛋白的开放阅读框(ORF),预测大ORF起始于AUG密码子位于第106-108位,终止于第9322-9324位的终止密码子;预测MW为348.69kDa。 (5)病毒的系统进化关系,采用邻接法构建BFBV YN-Tiger株系和其它马铃薯Y病毒成员的系统发育树,结果显示BFBV与BtMV的亲缘关系最近,BFBV与马铃薯病毒属中其它病毒共享43.9-55.12%氨基酸序列同一性,与BtMV的氨基酸相似性最高为55.12%,根据国际病毒分类委员会ICTV标准,该病毒分离物是暂时命名为“秋海棠碎色病毒”的PVY属病毒新物种的代表。 (6)血清学反应,根据进化树的结果选取亲缘关系最近的甜菜花叶病毒(BtMV)的血清进行该病毒血清反应测定,结果表明秋海棠碎色病毒与甜菜花叶病毒之间血清反应为阳性,为秋海棠碎色病毒属于马铃薯Y病毒属成员提供了血清学证据。 |
并列题名: | Begonia flower breaking virus (BFBV) biological characteristics and genomic characteristics |
题名主题: | 秋海棠碎色病毒 生物学特性 基因组特征 学位论文 |
中图分类: | S432.41-533 |
个人名称等同: | 唐艺榕 著 |
个人名称次要: | 吴红芝 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20210607 |